Neon? 轉(zhuǎn)染技術(shù)可高效地將核酸導(dǎo)入所有測(cè)試過(guò)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類(lèi)型，包括難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞、原代細(xì)胞和干細(xì)胞。這個(gè)開(kāi)放而靈活的核酸導(dǎo)入系統(tǒng)包含了一個(gè)小型的臺(tái)式電穿孔儀、一個(gè)電子移液器吸頭架、**的電子移液器吸頭，以及專(zhuān)用的試劑。

Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)：

高效——在多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型中獲得超過(guò)75%的轉(zhuǎn)染效率，包括難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，如原代細(xì)胞和干細(xì)胞(表1)

靈活——每次可輕松轉(zhuǎn)染2×10 4----6×10 6個(gè)細(xì)胞

簡(jiǎn)單——通用的試劑盒適用于所有細(xì)胞類(lèi)型

多功能——開(kāi)放的系統(tǒng)，可輕松調(diào)整轉(zhuǎn)染參數(shù)

簡(jiǎn)單易用的三步操作

即插即用

轉(zhuǎn)染步驟簡(jiǎn)單到不能再簡(jiǎn)單了(圖1)。(1) 將細(xì)胞和質(zhì)?；旌衔镂隢eon? 移液器吸頭中，(2) 插入到移液器吸頭架上，并按“開(kāi)始”。(3) 然后，只需將轉(zhuǎn)染過(guò)的細(xì)胞加入你的培養(yǎng)容器中。既不需要將樣品加入或移出電擊杯，也不需要加蓋和開(kāi)蓋。轉(zhuǎn)染發(fā)生在Neon? 移液器吸頭中。

圖1-Neon? 系統(tǒng)使用簡(jiǎn)單的3步轉(zhuǎn)染程序。

新穎的移液器吸頭(電反應(yīng)室)

與傳統(tǒng)的電擊杯一類(lèi)的電穿孔反應(yīng)室不同，Neon? 系統(tǒng)利用了生物兼容的**移液管反應(yīng)室，從而產(chǎn)生更均勻的電場(chǎng)(圖2)。這種設(shè)計(jì)能更好地維持生理?xiàng)l件，與傳統(tǒng)的電穿孔相比，細(xì)胞存活率非常高。

圖2. 標(biāo)準(zhǔn)的電擊杯反應(yīng)室與Neon? 移液器吸頭的比較。(A) 標(biāo)準(zhǔn)的電擊杯。(B) Neon? 移液器吸頭。在我們?nèi)碌囊埔浩魑^設(shè)計(jì)中，電極的設(shè)計(jì)已表明能產(chǎn)生能均勻的電場(chǎng)。終結(jié)果是細(xì)胞毒性更小，轉(zhuǎn)染效率更高。

杰出的效率

Neon? 轉(zhuǎn)染技術(shù)專(zhuān)為操作簡(jiǎn)單易用的高效率基因?qū)攵O(shè)計(jì)(圖3)。經(jīng)過(guò)一次防故障的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，即可在任何細(xì)胞類(lèi)型中將導(dǎo)入效率大化，同時(shí)將毒性小化(表1)(在毒性小化的條件下獲得大的導(dǎo)入效率)。利用Neon? 細(xì)胞數(shù)據(jù)庫(kù)中的驗(yàn)證步驟作為起點(diǎn)，來(lái)優(yōu)化你的實(shí)驗(yàn)。

圖3. 利用Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)來(lái)高效轉(zhuǎn)染Jurkat細(xì)胞。(A) 利用Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)轉(zhuǎn)染Jurkat細(xì)胞24小時(shí)后，編碼EGFP的報(bào)告載體的細(xì)胞內(nèi)吸收。(B) A圖的對(duì)應(yīng)熒光圖像。

表1-Neon? 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系。對(duì)于成功轉(zhuǎn)染過(guò)的細(xì)胞系的完整列表、操作步驟和更多的參考文獻(xiàn)資料，請(qǐng)?jiān)L問(wèn)www.invitrogen.com/neon。