數(shù)字PCR技術(shù),是通過(guò)將微量樣品作大倍數(shù)稀釋和分液(partitioning),直至每個(gè)樣品中所含有的待測(cè)分子數(shù)不會(huì)超過(guò)1個(gè),再將所有樣品在相同條件下進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并對(duì)發(fā)生了擴(kuò)增反應(yīng)的樣品逐個(gè)進(jìn)行計(jì)數(shù)的一種技術(shù)。特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測(cè)、基因相對(duì)表達(dá)研究(如等位基因不平衡表達(dá))、二代測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等。
有了數(shù)字PCR,在定量pcr時(shí),我們就不用再考慮究竟是相對(duì)定量還是**定量?盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計(jì)起始樣品中的核酸量,但它們有一個(gè)重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來(lái)測(cè)定核酸量,而dPCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的**定量。
由于OpenArray平板的開(kāi)放特性,數(shù)字PCR反應(yīng)重復(fù)的數(shù)量可輕松調(diào)整,以滿足應(yīng)用需求。它既可運(yùn)行單個(gè)子陣,也可運(yùn)行全部四塊平板。對(duì)于低精度的應(yīng)用,您可以增加樣品通量,降低成本,而對(duì)于高精度應(yīng)用,您又可以提高重復(fù)的數(shù)量,讓平臺(tái)性能大化。這種靈活性可輕松實(shí)現(xiàn),又不折損性能。
dPCR技術(shù)繼續(xù)發(fā)展,形成了ddPCR技術(shù)。這就是QuantaLife公司開(kāi)發(fā)出的微滴數(shù)字PCR技術(shù)。該產(chǎn)品還獲得了2011年度Frost & Sullivan北美新產(chǎn)品**獎(jiǎng)。2011年10月,Bio-Rad公司收購(gòu)了QuantaLife和ddPCR技術(shù),推出了QX100微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)。
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