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Clontech公司Xfect和Xfect Stem試劑

轉(zhuǎn)染是眾多基礎(chǔ)和應(yīng)用研究中的關(guān)鍵步驟?;蛘{(diào)控、蛋白表達(dá)及功能、轉(zhuǎn)基因等研究都離不開轉(zhuǎn)染。麻省理工大學(xué)的科學(xué)家篩選了2300多種候選聚合物,鑒定出轉(zhuǎn)染效果杰出的新型可生物降解的納米顆粒。Clontech擁有MIT的**許可,故將兩種化合物優(yōu)化,創(chuàng)造出今天的Xfect和Xfect Stem試劑。

Xfect轉(zhuǎn)染試劑適用于大部分細(xì)胞類型。經(jīng)過測(cè)試,它在一些常用的細(xì)胞系,如HeLa、HEK-293、CHO-K1和HT1080細(xì)胞中都有著80%以上的轉(zhuǎn)染效率。對(duì)于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,如Jurkat細(xì)胞,它比競爭產(chǎn)品的轉(zhuǎn)染效率高出40倍(圖1)。

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圖1. Xfect和Product LX轉(zhuǎn)染效率的比較。按照各自產(chǎn)品的操作手冊(cè)將含有AcGFP1的質(zhì)粒dna轉(zhuǎn)染到Jurkat細(xì)胞中,通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)AcGFP1的表達(dá)情況并確定轉(zhuǎn)染效率??梢钥闯鯴fect的轉(zhuǎn)染效率是ProductLX的40倍

此外,Xfect毒性也比較低(Table I)。以往,由于轉(zhuǎn)染試劑不能耐受血清,轉(zhuǎn)染過程中還得換成無血清培養(yǎng)基,甚是麻煩。Xfect則不受血清的影響,轉(zhuǎn)染全程都可以有血清的存在,使用更方便。

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Xfect Stem轉(zhuǎn)染試劑則是專為小鼠胚胎干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染而設(shè)計(jì)的。胚胎干細(xì)胞的研究持續(xù)升溫,但轉(zhuǎn)染始終是個(gè)令人頭疼的問題。胚胎干細(xì)胞似乎“百毒不侵”,抗拒著外來的DNA。Xfect Stem則是從2300多個(gè)候選者中脫穎而出的佼佼者,在干細(xì)胞轉(zhuǎn)染上有著不俗的表現(xiàn)。經(jīng)過驗(yàn)證,它在小鼠胚胎干細(xì)胞系E14TG2A 和D3中的轉(zhuǎn)染效率均高于市場(chǎng)上暢銷的其他試劑(圖2)。

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